操作步驟 ：

①．從室溫平衡20min後的鋁箔袋中取出所需板條 ，剩餘板條用自封袋密封放回4℃ 。

②．設置標準品孔和樣本孔 ，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL ；

③．樣本孔先加待測樣本10μL ，再加樣本稀釋液40μL ；空白孔不加 。

④．除空白孔外 ，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL ，用封板膜封住反應孔 ，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min 。

⑤．棄去液體 ，吸水紙上拍幹 ，每孔加滿洗滌液 ，靜置1min ，甩去洗滌液 ，吸水紙上拍幹 ，如此重複洗板5次   （也可用洗板機洗板） 。

⑥．每孔加入底物A 、B各50μL ，37℃避光孵育15min 。

⑦．每孔加入終止液50μL ，15min內 ，在450nm波長處測定各孔的OD值 。

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