产品列表PROUCTS LIST
新闻动态NEWS
浅析E2检测ELISA试剂盒基础小知识
点击次数：1036 更新时间 ：2019-12-28
浅析E2检测ELISA试剂盒基础小知识
E2检测ELISA试剂盒样品收集 、处理及保存方法
1. 血清 ：使用不含热原和内毒素的试管 ，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝 。3000转离心30分钟取上清 。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆 ：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清 。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测 ，请按一次用量分装 ，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻 。
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶*溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中 ，密封（低温干燥）保存。
3. 标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白；预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可 。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
E2检测ELISA试剂盒操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条 ，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 待测样本孔先加待测样本10μL ，再加样本稀释液40μL ；
4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL ，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体 ，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液 ，静置1min ，甩去洗涤液 ，吸水纸上拍干 ，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板） 。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min 。
7. E2检测ELISA试剂盒每孔加入终止液50μL，15min内 ，在450nm波长处测定各孔的OD值 。
上一篇 ELISA试剂盒临床标本的收集和保存 下一篇 小鼠y干扰素诱导蛋白ELISA试剂盒样本处理及要求