組織結構 ：

1 、血清 ：操作過程中避免任何細胞刺激 。使用不含熱原和內毒素的試管 。收集血液後 ，1000×g離心35分鍾將血紅細胞迅速小心地分離 。

2 、血漿：EDTA 、檸檬酸鹽 、肝素血漿可用於檢測 。1000×g離心60分鍾去除顆粒 。

3 、細胞上清液 ：1000×g離心32分鍾去除顆粒和聚合物 。

4 、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎 。1000×g離心33分鍾 ，取上清液 。

5 、保存 ：如果樣品不立即使用 ，應將其分成小部分-70℃保存 ，避免反複冷凍 。盡可能的不要使用溶血或高血脂血 。如果血清中大量顆粒 ，檢測前先離心或過濾 。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍 。應在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍 。

犬(VE)ELISA試劑盒操作步驟 ：

標準品的稀釋 ：本試劑盒提供原倍標準品一支 ，依次進行稀釋數倍 。

加樣 ：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑 ，其餘各步操作相同) 、標準孔 、待測樣品孔 。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl ，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl ，然後再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍) 。加樣將樣品加於酶標板孔底部 ，盡量不觸及孔壁 ，輕輕晃動混勻 。

溫育 ：用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾 。

配液 ：將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用

洗滌 ：小心揭掉封板膜 ，棄去液體 ，甩幹，每孔加滿洗滌液 ，靜置30秒後棄去 ，如此重複5次 ，拍幹 。

加酶 ：每孔加入酶標試劑50μl ，空白孔除外 。

溫育 ：操作同3 。

洗滌 ：操作同5 。

顯色 ：每孔先加入顯色劑A50μl ，再加入顯色劑B50μl ，輕輕震蕩混勻 ，37℃避光顯色10分鍾.

終止 ：每孔加終止液50μl ，終止反應(此時藍色立轉黃色) 。

測定 ：以空白空調零 ，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 。 測定應在加終止液後15分鍾以內進行 。

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