用於免疫酶技術的酶有很多 ，如過氧化物酶 ，堿性磷酸酯酶 ，β－Ｄ－半乳糖苷酶 ，葡萄糖氧化酶 ，碳酸酐酶 ，乙酰酯酶 ，6－磷酸葡萄糖脫氧酶等 。常用於ELISA法的酶有辣根過氧化物酶 ，堿性磷酸酯酶等 ，其中尤以辣根過氧化物酶為多 。由於酶摧化的是氧化還原反應 ，在呈色後須立刻測定 ，否則空氣中的氧化作用使顏色加深 ，無法準確地定量 。

　　辣根過氧化物酶（HRP）是一種糖蛋白 ，每個分子含有一個氯化血紅素（protonhemin）區作輔基 。酶的濃度和純度常以輔基的含量表示 。氯化血紅素輔基的zui大吸收峰是403nm ，HRP酶蛋白的zui大吸收峰是275nm ，所以酶的濃度和純度計算式是（已知HRP的A（1cm 403nm 1%）＝25 ，式中1％指HRP百分濃度為100ml含酶蛋白1g ，即10mg/ml ，所以 ，GT-17檢測ELISA試劑盒酶濃度以 mg/ml 計算是HRP的A（1cm 403nm mg/ml=2.5）HRP純度（RZ）=A403nm/A275nm純度RZ（Ｒeinheit Zahl）值越大說明酶內所含雜質越少 。高純度HRP的RZ值在3.0左右 ，zui高可達3.4 。用於ELISA檢測的HRP的RZ值要求在3.0以上 。

　　GT-17檢測ELISA試劑盒的基本原理有三條 ：

　　（1）抗原或抗體能以物理性地吸附於固相載體表麵 ，可能是蛋白和聚苯乙烯表麵間的疏水性部分相互吸附 ，並保持其免疫學活性 ；

　　（2）抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物 ，而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性 ；

　　（3）GT-17檢測ELISA試劑盒酶結合物與相應抗原或抗體結合後 ，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在 ，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的 ，因此 ，可以按底物顯色的程度顯示試驗結果 。