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ELISA試劑盒實驗中怎麽挑選*化的包被條件
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:2018-11-01
1.包被抗原的挑選
包被抗原可分為天然蛋白
、重組蛋白和小分子抗原三大類
。天然蛋白需經純化才能用直接吸附法包被,關於含雜質較多的抗原能夠選用直接捕獲法包被(先用能夠與意圖抗原反響的物質如抗體直接吸附在酶標板上
,再經過特異性反響使抗原固相化)
。經純化的重組蛋白一般皆可直接包板
。小分子抗原比方多肽以及一些小分子有機化合物
,由於分子量太小
,往往難於直接吸附在酶標板上
,一般都先使其與無關蛋白質如BSA等偶聯
,偶聯物吸附於固相載體上
。
2.包被液的挑選
一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩衝液
,假如包被的抗原在堿性條件下不穩定的話
,也能夠運用pH7.2的磷酸鹽緩衝液
。
3.包被溫度的挑選
通常是4-8度條件下24小時後或許37度保溫2小時
,咱們強烈建議4-8度條件下包被
,有利於蛋白活性的保持
。