洗刷在進程中雖不是一個反響進程 ,但卻決議著試驗的勝敗 。ELSIA就是靠洗刷來到達別離遊離的和結合的酶標記物的意圖 。經過洗刷以鏟除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質 ,以及在反響進程中非特異性地吸附於固相載體的攪擾物質 。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的 ,而在洗滌時應把這種非特異性吸附的攪擾物質洗刷下來 。可以說在ELISA操作中 ,洗刷是zui主要的關鍵技能 ,應引起操作者的高度重視 ,操作者應嚴厲按要求洗刷 ,不得大意 。
ELISA試劑盒試驗洗板方法有以下兩點
:
1.主動洗板
:如果有主動洗板機
,應在嫻熟使用後再用到正式試驗進程中
。待檢樣本
:體液
、血清
、血漿
、細胞培養上清液
、尿液
、安排勻漿
、心房水標本等
。
2.手藝洗板方法
:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體
;在試驗台上襯托幾層吸水紙
,酶標板朝下用力拍幾回
;將引薦的洗刷緩衝液至少0.3ml注入孔內
,浸泡1-2分鍾
,根據需要
,重複此進程數次
。
加酶物
,加底物
。凍住血清融解後
,蛋白質部分濃縮
,分布不均
,應充分混勻宜輕緩
,防止氣泡
,可上下倒置混和
,不要在混勻器上激烈振蕩。製備血漿標本需借助於抗凝劑
,而血清標本隻需待血清天然凝結
、縮短後即可取得
。也可在板孔中參與稀釋液
,再在其參與血清標本
,然後在微型轟動器上轟動1分鍾以確保混和
。一般說來
,在5天內測定的血清標本可放置於4℃
,超越一星期測定的需低溫冰存
。
離子通道蛋白Kv3.4IgG 人磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)
離子通道蛋白Kv4.3 人淋巴因子
離子通道蛋白Kv4.3IgG 人淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)
離子轉運相關蛋白SLC7A9IgG 人淋巴抗原6複合物基因座A(Ly6a)
利鈉肽受體CIgG 人淋巴功能相關抗原3(LFA-3/CD58)
粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子3受體IgG 人淋巴功能相關抗原2(LFA-2/CD2)
粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子IgG 人淋巴毒素β(LTB)
粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體αIgG 人淋巴毒素α(LTA)