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影響抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒檢測效果的幾大因素
點擊次數 :1384 更新時間 :2017-08-22

質量保證是一個複雜的過程 ,許多重要的環節都影響到檢測的效果 :
一 、方法學的影響
ELISA測定模式包括以下幾種 :雙抗體夾心法 、間接法 、雙抗原夾心法 、IgM抗體捕捉法 、競爭抑製法 ,其中競爭抑製法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不平競爭等因素的影響 ,結果重複性較差 ,質
量較難控製 。

二 、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在製作過程中很難保證質量*一致 ,即使是通過批批檢的項目其檢測結果也存在差異 ,因此必須選擇和訂購長批號的試劑 ,並保證保存條 件 。嚴格執行這一標準可以避免因試劑批號改變而新建立質控體係及重新評估試劑的複雜過程 ,並且能夠保證結果的穩定性 ;對於效期短 、使用率低的試劑 ,當小量分裝 ,每次使用則取分裝部分即可 ,避免反複凍融造成試劑的失效 。
1 、避免直接接觸終止液和底物A 、B 。一旦接觸到這些液體 ,請盡快用水衝洗 。
2 、實驗中不要吃喝 、抽煙或使用化妝品 。
3 、不要用嘴吸取試劑盒裏的任何成份 。

三 、樣本因素
標本幹擾因素包括內源性幹擾因素和外源性幹擾因素 ,前者包括類風濕因子、補體 、異嗜性抗體 、自身抗體 、等 ,後者包括標本溶血 、標本被細菌汙染 、標本貯存時間過長 、標本凝固不全 、冷凍標本的反複凍融等 。將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating) 。換言之 ,包被即是抗原或抗體結合到固相載體表麵的過程 。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合 的 ,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表麵的疏水基團間的作用於 。這種物理吸附是非特異性的 ,受蛋白質的分子量 、等電點 、濃度等的影響 。載體對不同蛋白質的吸附能力是不相同的 ,大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團 ,故更易吸附到固相載體表麵 。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附 力 ,其聯結多發生在Fc段上 ,抗體結合點暴露於外 ,因此抗體的包被一般均采用直接吸附法 。蛋白質抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被 。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質抗原可采用特殊的包被方式 。例如 ,在檢測抗DNA抗體時 ,需用DNA作為包被抗原 ,而普遍的固載體一般不能直接與核酸結合 。 可將聚苯乙烯板先經紫外線照射(例如30W紫外燈 ,75cm照射12小時) ,以增加其吸附性能 。固相載體先用堿性蛋白質 ,如聚賴氨酸 、等作預包 被 ,也可提高核酸的結合力 。也可
用親和素係統作間接包被 ,即用親和素先包被載體 ,然後加入化的DNA ,這種包被方法均勻 、牢固 ,已擴大應用於 各種抗原物質的定量測定 。
YSRIBIO1568    Astemizole    阿司咪唑標準品    68844-77-9    200mg    
YSRIBIO1569    Aspirin    標準品    50-78-2    500mg    
YSRIBIO1570    Aspartic Acid    標準品    1825910    100mg    
YSRIBIO1571    Aspartame Acesulfame    阿斯巴甜安賽蜜標準品    106372-55-8    200mg    
YSRIBIO1572    Aspartame    阿斯巴甜標準品    22839-47-0    200mg    
YSRIBIO1573    Asparagine Monohydrate    一水天冬酰胺標準品    5794-13-8    200mg    
YSRIBIO1574    Asparagine Anhydrous    無水天冬酰胺標準品    70-47-3    200mg    

 

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