用於臨床檢驗的主要有以下幾種類型
:
1.雙抗體夾心法測抗原
雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法
,操作步驟如下
:
1)將特異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體
。洗滌除去未結合的抗體及雜質
。
2)加受檢標本
,保溫反應
。標本中的抗原與固相抗體結合
,形成固相抗原抗體複合物
。洗滌除去其他未結合物質
。
3)加酶標抗體
,保溫反應
。固相免疫複合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體
。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關
。1.血清
血清是zui常用於檢測的一類樣本
。
采血過程中應避免溶血
,因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質
,在以HRP為標記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色
,而導致檢測的不準確性
。同時也應避免細菌汙染
,因為菌體內可能含有內源性的HRP從而導致檢測的假陽性
。
2.血漿
用含抗凝劑的或離心管采集血液標本
,標本采集後30min內4℃ 1000×g離心15min
,取上清即血漿
。將上清分裝多份
,-20℃或-80℃保存
,避免反複凍融
。避免使用溶血或高血脂的標本
。
3.細胞培養上清
取細胞培養上清到離心管
,1000×g離心20min
,除去細胞碎片及雜質
,取上清
,-20℃或-80℃保存
,避免反複凍融
。
4.細胞裂解液
5.組織勻漿液
6
、尿液、唾液等其他液體生物樣本
肺表麵活性物質相關蛋白CElisa試劑盒可用於測定抗原
,也可用於測定抗體
。在這種測定方法中有三個必要的試劑
:
(1)固相的抗菌素原或抗體
,即"免疫吸附劑"(immunosorbent)
;
(2)酶標記的抗原或抗體
,稱為"結合物"(conjugate)
;
(3)酶反應的底物
。根據的來源和標本的情況以及檢測的具體條件
,可設計出各種不同類型的檢測方法
。