小鼠胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒檢測步驟解析
從室溫平衡20min後的鋁箔袋中取出所需板條 ,剩餘板條用自封袋密封放回4℃ 。
設置標準品孔
、樣本孔和空白孔
,空白孔什麽都不加;標準品孔各加不同濃度的標準品50μL
;
待測樣本孔先加待測樣本10μL
,再加樣本稀釋液40μL
;
隨後標準品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體50μL
,
,用封板膜封住反應孔
,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min
。
棄去液體
,吸水紙上拍幹
,每孔加滿洗滌液
,靜置1min
,甩去洗滌液
,吸水紙上拍幹
,如此重複洗板5次(也可用洗板機洗板)
。
所有孔加入底物A
、B各50μL
,37℃避光孵育15min
。
所有孔加入終止液50μL
,15min內
,在450nm波長處測定各孔的OD值
。
結果判斷
繪製標準曲線
:在Excel工作表中
,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標
,繪製出標準品線性回歸曲線
,按曲線方程計算各樣本濃度值
。
試劑盒性能
1.準確性
:標準品線性回歸與預期濃度相關係數R值
,大於等於0.9900
。
2.靈敏度
:zui低檢測濃度小於1.0 pg/ml
。
3.特異性
:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4.重複性:板內
、板間變異係數均小於15%
。
5.貯藏
:2-8℃
,避光防潮保存
。
6.有效期
:6個月
7.檢測範圍
:31.2pg/ml-1000pg/ml
免責聲明
1.試劑盒僅供研究使用,不得用於臨床實驗或小鼠體實驗
,否則所產生的一切後果
,由實驗者承擔
,本公司概不負責
。
2.嚴格按照說明書操作
,不同批號不可交換使用
,實驗者違反說明書操作
,後果由實驗者承擔。
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