肺表麵活性物質相關蛋白CElisa試劑盒實驗中操作技巧
適用於體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測
。
那麽它有哪些操作技巧呢
?
1.加酶試劑後用吸水紙在酶標板表麵輕拭吸幹
。
2.合理安排檢測量
,以免反應板過多造成洗板等待時間長
。
3.吸取液體時
,要用量程和需要量接近的槍去吸
,減少誤差
。
4.要盡量做雙孔實驗
,這樣才既能保證數據的準確性
,又能反映出試劑盒的精密度
。
5.樣品稀釋液應用加液器加注
,並經常校對其準確性。
6.為防止樣品蒸發
,試驗時將反應板放於鋪有濕布的密閉盒內
,酶標板加上蓋或覆膜
。
7.未使用完的酶標板或者試劑
,請於2-8℃保存
。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用
。請勿重複使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液
。
8.實驗中
,加樣後及時放人孵箱
,標本較多時
,要分批操作。按說明步驟嚴格控製操作時間
,防止孵育時間人為延長
,導致非特異性結合緊附於反應孔周圍
,難以清洗*
。
9.手工洗板時每次加入洗滌液後
。應靜置15~30s
,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中
,防止交叉汙染
。甩去洗滌液後將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍幹
。
10.對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證
。
11.沒有去離子水或雙蒸水時
,可以使用娃哈哈純淨水配製溶液
,切勿使用自來水
。
12.在使用微量加樣器時
,吸取不同瓶子中液體後要更換槍頭
,即使吸取標準品溶液
。
13.剩餘樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鍾
,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鍾後廢棄
。
14.洗滌時各孔均需加滿液體
,防止孔口有遊離酶不能洗淨。
15.每次實驗留一孔作為空白調零孔
,該孔不加任何試劑
,隻是zui後加底物溶液及2N H2SO4
。測量時先用此孔調OD值至零
。
16.吸取液體時速度不易太快
,以免產生氣泡,吸取的量不夠準確
。
17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸
,減少誤差
。