植物組織RNA提取的技巧
從植物組織中提取RNA 是進行植物分子生物學方麵研究的必要前提
。要進行Northern雜交分析
，純化mRNA 以用於體外翻譯或建立cDNA文庫
，RT-PCR及差示分析等分子生物學研究
，都需要高質量的RNA
。因此
，從植物組織中提取純度高
、完整性好的RNA 是順利進行上述研究的關鍵所在
。
從文獻報道上看
，有許多植物就是由於未能有效地分離純化其組織中的RNA
，而阻礙了其分子生物學方麵研究的進展
。一般認為在這些植物組織中
，或富含酚類化合物
，或富含多糖
，或含有某些尚無法確定的次級代謝產物
，或RNase的活性較高
。在完整的細胞內這些物質在空間上與核酸是分離的
，但當組織被研磨
，細胞破碎後
，這些物質就會與RNA 相互作用
。酚類化合物被氧化後會與RNA 不可逆地結合
，導致RNA 活性喪失及在用
、抽提時RNA 的丟失
，或形成不溶性複合物
；而多糖會形成難溶的膠狀物
，與RNA 共沉澱下來
；萜類化合物和RNase會分別造成RNA 的化學降解和酶解。對於這些植物材料
，用常規的RNA 提取方法（如胍法
、法和十六烷基*基溴化胺法等）難以提取出其RNA
。如Lбpez-Gбmez等在用常規的方法提取芒果果實的RNA 時未能成功
，他們的結果分為三種情況
：提出的RNA 已被降解
；RNA 的得率很低；得到的RNA 不能進行體外翻譯
。他們認為在果實成熟時各種酶的活性增強
，其中也包含RNase
，不溶性的澱粉轉化為可溶性的多糖
，芒果果實細胞壁中特殊的成份
，以及果實中高含量的多酚化合物都是幹擾RNA 提取的因素
。Tesniere等在用法和胍法提取葡萄果實的RNA 時
，發現RNA 與某種未知化合物凝聚成不溶性的複合物
，並且這種未知化合物在230nm和270nm處有強的光吸收
，從而幹擾了RNA 紫外吸收的測定
。因此能否有效地去除多糖
、酚類化合物
、RNase和幹擾RNA 提取的其它代謝產物是提取高質量植物RNA 成敗的關鍵
。本文根據文獻綜述了解決上述植物RNA 提取過程中難點的相應對策
。