植物组织RNA提取的技巧
从植物组织中提取RNA 是进行植物分子生物学方面研究的必要前提 。要进行Northern杂交分析 ，纯化mRNA 以用于体外翻译或建立cDNA文库 ，RT-PCR及差示分析等分子生物学研究，都需要高质量的RNA 。因此，从植物组织中提取纯度高 、完整性好的RNA 是顺利进行上述研究的关键所在。
从文献报道上看 ，有许多植物就是由于未能有效地分离纯化其组织中的RNA ，而阻碍了其分子生物学方面研究的进展 。一般认为在这些植物组织中，或富含酚类化合物 ，或富含多糖 ，或含有某些尚无法确定的次级代谢产物，或RNase的活性较高 。在完整的细胞内这些物质在空间上与核酸是分离的，但当组织被研磨，细胞破碎后，这些物质就会与RNA 相互作用 。酚类化合物被氧化后会与RNA 不可逆地结合，导致RNA 活性丧失及在用 、抽提时RNA 的丢失，或形成不溶性复合物；而多糖会形成难溶的胶状物 ，与RNA 共沉淀下来；萜类化合物和RNase会分别造成RNA 的化学降解和酶解 。对于这些植物材料，用常规的RNA 提取方法（如胍法、法和十六烷基*基溴化胺法等）难以提取出其RNA 。如Lбpez-Gбmez等在用常规的方法提取芒果果实的RNA 时未能成功，他们的结果分为三种情况 ：提出的RNA 已被降解 ；RNA 的得率很低；得到的RNA 不能进行体外翻译。他们认为在果实成熟时各种酶的活性增强 ，其中也包含RNase ，不溶性的淀粉转化为可溶性的多糖，芒果果实细胞壁中特殊的成份，以及果实中高含量的多酚化合物都是干扰RNA 提取的因素。Tesniere等在用法和胍法提取葡萄果实的RNA 时，发现RNA 与某种未知化合物凝聚成不溶性的复合物，并且这种未知化合物在230nm和270nm处有强的光吸收 ，从而干扰了RNA 紫外吸收的测定。因此能否有效地去除多糖 、酚类化合物 、RNase和干扰RNA 提取的其它代谢产物是提取高质量植物RNA 成败的关键。本文根据文献综述了解决上述植物RNA 提取过程中难点的相应对策。