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ELISA檢測試劑盒的工作原理
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:971 更新時間
:2016-08-22
ELISA檢測試劑盒的工作原理
ELISA檢測試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術
,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條
,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段
,分別來自於該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3
。
ELISA檢測試劑盒將樣品或標準品加入孔中並孵育
,如果其中存在HEV IgM抗體
,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結合
,並固定在上麵
,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份
。
然後加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物
,經第二次孵育後
,酶結合物就會與*次孵育結合上的HEV IgM抗體相結合
,洗板除去未結合的酶結合物
,加入TMB底物溶液
,在第三次孵育時會發生酶-底物反應,ELISA檢測試劑盒隻有那些含有HEV IgM抗體和酶結合物所形成的複合物的孔才會發生顏色變化
,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應
,並在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標準, O.D.值大於或等於Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性
。