1． ：選對數生細胞 ，收集細胞24小時前換液一次 。 
  2．計數 ：按常規方法把細胞製成細胞懸液 ，計數 ，令細胞密度達5×106/ml ，離心去上清 ，吸入離心 管中 。 
  3．凍存液 ：先用培養液9分＋DMSO 1分（或甘油）配成10％的DMSO凍存液 ，按上法一滴滴加入離心管中 ，然後用吸管輕輕吹打令細胞重懸 。 
  4．分裝 ：分裝入無菌安剖中 ，每安剖加1.5毫升細胞懸液 。 
  5．封口 ：用塑料安剖時擰緊瓶口即可 ；如用火焰封閉安剖口後 ，仔細檢查 ，定要封嚴 ，必要時可浸入藍色液中觀察 ，為安全起見 ，把安剖縫入紗布小袋中 ，以防液氮浸入後 ，融解時因受熱發生爆炸傷人 ；紗袋一端係以線繩 ，末端紮有小牌 ，注明 ：細胞名稱 ，凍存日期 ，以便日後查找 。

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