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ELISA試劑盒包被條件的優化
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:1005 更新時間
:2016-04-13
包被條件的優化
:
1.包被液的選擇
:一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩衝液
,如果包被的抗原在堿性條件下不穩定的話
,也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩衝液
。
2.包被濃度的選擇
:包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質變化
,一般蛋白質的包被濃度為1- 5ug/ml
,要明確針對特定包被抗原的zui適包被濃度需要通過實驗來確定
。
3.包被溫度的選擇
:通常是4-8度條件下放置一個晚上或者37度保溫2小時
,老哥俱樂部強烈建議4-8度條件下包被
,有利於蛋白活性的保持
。
4.包被抗原的選擇
:可分為天然蛋白
、重組蛋白和小分子抗原三大類
。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機化合物
,由於分子量太小
,往往難於直接吸附在酶標板上
,一般都先使其與無關蛋白質,比如BSA等偶聯
,偶聯物吸附於固相載體上
。