(一)pH調整液

    合成培養液大多呈弱酸性 ，而生長的zui適pH值為7．0～7．2 ，因此使用培養液時要調整pH ，並注意培養過程中pH的變化 ，及時換液 。常用的pH調整液包括NaHCO3溶液和Hepes緩衝液 。

1.NaHCO3溶液NaHCO3是培養基中必須添加的成分 ，一般情況下按照說明書要求添加，以保證培養基在5％CO2的環境中pH達到設計標準 。通常情況下 ，培養液添加血清後可能偏酸 ，可臨時用NaHCO3溶液調節其pH值 。常用的NaHC3溶液濃度為7．4％ 、5．6％ 、3．7％三種 。調節pH時 ，NaHCO3溶液要逐滴加入 ，並不時搖動培養液，以防止加入過量 。若pH過高時 ，可用高壓滅菌10％醋酸溶液或通人CO2氣體調節 。配製時用三蒸水溶解後 ，過濾除菌 ，分裝備用 。亦可使用高壓蒸氣滅菌 ，密封 ，4℃冰箱保存 。

2．Hepes緩衝液是一種可以保持培養過程中pH值較長時間穩定的氫離子緩衝劑。一般在克隆化培養時要添加H印es緩衝液 。通常使用濃度為10～15mmol／L 。配製時，稱取所需的Hepes ，用培養液溶解後 ，用1mmol／L NaOH調節pH到7．O ，過濾除菌分裝後備用 。

(二)抗生素液

    細胞培養中經常使用的抗生素是青 ，俗稱“雙抗溶液” ，可以預防絕大多數的細菌汙染 。使用的終濃度為100U／ml ，為100μg／ml 。常用Hanks或PBS配製為100倍濃縮液．分裝凍存 ，使用前經稀釋後加入到培養液中 。

(三)補充液

    在代謝過程中起重要作用 ，合成培養基中都要添加 。易降解 ，應在使用前添加 。常配製100倍濃度的濃縮液 ，濃度為200mmol／L 。使用時 ，每lOOml培養液中加入0．5～2ml濃縮液 ，終濃度為1～4mmol／L 。

上一篇 異核體的形成 下一篇 細胞增殖曲線的測定