使用方法 ：

測定法的靈敏度來自作為報告的酶 。酶是一種有機催化劑 ，很少量的酶即可誘導大量的催化反應 ，產生可供觀察的顯色反應現象 。因此該體係常被稱為酶放大體係 。

1. 標準品的稀釋 ：本試劑盒提供原倍標準品一支 ，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋 。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣 ：分別設空白孔、標準孔 、待測樣品孔 。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl ，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl ，然後再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍） 。加樣將樣品加於酶標板孔底部 ，盡量不觸及孔壁 ，輕輕晃動混勻 。

3. 溫育 ：用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾 。   

4. 配液 ：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用

5. 洗滌 ：小心揭掉封板膜 ，棄去液體 ，甩幹 ，每孔加滿洗滌液 ，靜置30秒後棄去 ，如此重複5次 ，拍幹 。

6. 加酶 ：每孔加入酶標試劑50μl ，空白孔除外 。

7. 溫育 ：操作同3 。

8. 洗滌：操作同5 。

9. 顯色 ：每孔先加入顯色劑A50μl ，再加入顯色劑B50μl ，輕輕震蕩混勻 ，37℃避光顯色15分鍾.

10. 終止 ：每孔加終止液50μl ，終止反應（此時藍色立轉黃色） 。

11. 測定 ：以空白空調零 ，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值） 。 測定應在加終止液後15分鍾以內進行 。

 

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