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胚胎胰腺組織來源細胞
;CCC-HPE-2培養操作步驟
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:11 更新時間
:2024-05-30
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出 ,用無菌絲綢布擦拭幹淨 ,不要用紗布 ;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片) ;
3.在距離紫外燈直射範圍內20-30 厘米處照射2-3小時 ;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中 ,使蓋玻片*浸在培養液中 ;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3麵積時 ,將培養板取出 ,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片 ,用蒸餾水漂洗後即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測 。
實驗要點及說明 :
1.本方法適用於貼壁細胞培養 ,而不適用於懸浮細胞培養 ,懸浮細胞可使用滴片法 ;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃 ,並經過鉻酸洗液處理 ;
3.蓋玻片非常薄 ,易碎 ,取放蓋玻片時動作要輕 ;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿 ,但不宜過大 ,以避免培養液的浪費和增加汙染機率 ;
5.如果細胞貼壁生長能力較差 ,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹 。