嗜熱脂肪芽孢杆菌 血清/培養基菌種的培養 :
1 、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料 。菌種分為母種(一級種) 、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級 。工業發酵的有用菌種 ,其篩選步驟包括菌種分離 、初篩和複篩 。
2 、產品僅用於科研挑選具有某種能力的有用菌種 ,也稱種子製備 ,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養成為具有一定數量和質量的純菌種的製備過程 。以作接入發酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用 。
3 、種子製備包括孢子製備和菌絲體製備 菌種製備 。
4 、保存在沙土管或冷凍管中的菌種 ,用無菌手續挑取少許 ,接入瓊脂斜麵培養基上 ,在25℃(或較高溫度)下培養5~7天(或較長時間 。所得孢子還需進一步用較大表麵積的固體培養基以獲得更多孢子(對於黴菌類孢子製備 ,多數采用大米 、小米之類的天然培養基) 。
5 、將培養成熟的斜麵孢子製成懸浮液 ,接種到扁瓶固體培養基上 ,於25~28℃培養4天 。將成熟的扁瓶孢子於真空中抽幹 ,使水分降至0%以下 ,並放入 4℃冰箱中備用 。一次製得的孢子瓶可在上延續使用半年左右 。
6 、如果有些菌種不產孢子 ,如赤黴素產生菌或產孢子不多的 ,則可采用搖瓶液體培養製得菌絲體 ,作種子罐的種子 。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發芽 、生長 、繁殖成大量菌體 。其中的培養基組分應是易於被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿) ,及無機鹽(如磷酸鹽)等 。作為發酵罐的種子應生命力旺盛 、染色深 、菌絲粗壯 ,無雜菌及異常菌體 。接種量一般在0%~20% 。