提取物培養操作:
產品僅供科研使用1）複蘇細胞 ：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻 。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾 ，棄去上清液 ，補 加 1-2mL 培養基後吹勻 。然後將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中 ，加入約 8ml 培養基 ，培養過夜） 。第二天換液並 檢查細胞密度 。
2）細胞傳代 ：如果細胞密度達 80%-90% ，即可進行傳代培養 。
1. 棄去培養上清 ，用不含鈣 、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次 。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中 ，置於 37℃培 養箱中消化 1-2 分鍾 ，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況 ，若細胞大部分 變圓並脫落 ，迅速拿回操作台 ，輕敲幾下培養 瓶後加少量培養基終止消 化 。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基 ，輕輕打勻後吸出 ，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾 ，棄去上清液 ，補加 1-2mL 培養液後吹勻 。
4. 將細胞懸液按 1 ：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中 。
3）細胞凍存 ：待細胞生長狀態良好時 ，可進行細胞凍存 。下麵 T25 瓶為類 ；
1. 細胞凍存時，棄去培養基後 ，PBS 清洗一遍後加入 1ml yi酶 ，細胞變圓 脫 落後 ，加入 1ml 含血清的培養基終止消化 ，可使用血球計數板計數 。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清 。加 1ml 血清重懸細胞 ，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO ，輕輕混勻 ，DMSO 終濃度為 10% ，細胞密度不低於1x106/ml ，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液 ，注意凍 存管做好標識 。
3. 將凍存管置於程序降溫盒中 ，放入-80 度冰箱 ，2 個小時以後轉入液氮灌儲存 。記錄凍存管位置以便下次拿取 。
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